Производи

Серин/треонин протеинските фосфатази се опишани кај многу патогени бактерии како есенцијални ензими вклучени во патеките за трансдукција на сигнали зависни од фосфорилација и често поврзани со вирулентноста на овие организми.Инспекцијата на геномот на Mycoplasma synoviae откри присуство на ген (prpC) кој кодира наводна протеинска фосфатаза од подфамилијата на протеин фосфатаза 2C (PP2C).Овде, известуваме за целосна биохемиска карактеризација на M. synoviae фосфатазата (PrpC) и посебната улога на металните јони во односот структура-функција на овој ензим.Анализата на секвенцата на аминокиселините на PrpC откри дека сите остатоци вклучени во центарот на динуклеарниот метал и наводните трети метални јонско-координирани остатоци, конзервирани во PP2C фосфатазите, се присутни во PrpC.PrpC е мономерен протеин способен да дефосфорилира фосфо-супстрати со зависност од Mn(2+) јони.Анализата на термичка стабилност ја покажа стабилноста на ензимот на благи температури и влијанието на Mn(2+) јоните во ова својство.Анализата на масовната спектрометрија сугерираше дека три метални јони се врзуваат за PrpC, од кои два со очигледна константа со висок афинитет.Мутациската анализа на наводните трети метал-координирачки остатоци, Asp122 и Arg164, откри дека овие варијанти покажале послабо врзување на јоните на манган и дека и двете мутации влијаеле врз активноста на PrpC фосфатазата.Според овие резултати, PrpC е член на протеинска фосфатаза зависен од метал со подобрена стабилност во форма на холо и со Asp122, веројатно вмешана во третото место за врзување на металот, од суштинско значење за каталитичката активност.