Производи

Ефекти на детергентите врз активноста на P-гликопротеин атпаза: разлики во пертурбациите на базалните и верапамил-зависните активности.

P-гликопротеинот (P-gp), гликопротеин на плазма мембраната поврзан со фенотипот на отпорност на повеќе лекови, е одговорен за АТП-зависен одлив на различни амфифилни лекови.Користејќи мембрански везикули подготвени од клеточната линија DC-3F/ADX отпорна на повеќе лекови, ја проучувавме пертурбацијата на базалните (т.е. во отсуство на лек) и активностите на P-gp ATP-аза зависни од верапамил, индуцирани од различни детергенти, при несолубилизација, како и при растворливи концентрации.Прогресивната растворливост на мембраната со зголемена концентрација на детергент беше следена со експерименти со расејување на светлина и центрифугирање.За концентрациите на детергент што не се раствораат, сите тестирани детергенти освен DOC предизвикаа делумна инхибиција на активноста на P-gp ATP-аза, што не беше во корелација со количината на различните тестирани детергенти вградени во мембраните.Анализата на активирањето на P-gp индуцирано од верапамил открива дека активноста на P-gp ATP-азата е различно модулирана од различните детергенти при концентрации кои не се раствораат.Така, специфичните интеракции помеѓу P-gp и детергентите се со поголема веројатност да се појават наместо глобална мембрана пертурбација.По растворањето со различните тестирани детергенти, базалната активност на P-gp ATP-аза беше практично целосно инхибирана, освен во присуство на CHAPS кој беше во можност да ја зачува оваа активност на ниво споредливо со она измерено во природните мембрани.Сепак, активирањето на P-gp ATP-аза индуцирано од верапамил беше изгубено за време на растворливоста на P-gp со CHAPS, но се обнови по разредувањето на CHAPS под неговата критична мицеларна концентрација.Овие набљудувања укажуваат на специфични интеракции помеѓу молекулите P-gp и CHAPS во мешаните мицели.Во целина, нашите податоци кои докажуваат специфични интеракции P-gp/детергенти се конзистентни со локацијата на местата за транспорт на лекови на трансмембранските домени P-gp.