Производи

Оксидативното оштетување на ДНК базите најчесто резултира со формирање на оксидирани пурини, особено 7,8-дихидро-8-оксогванин (8-оксоГ) и 7,8-дихидро-8-оксоаденин (8-оксоА), првиот е добро- позната мутагена лезија.Бидејќи 8-oxoG е лесно подложен на понатамошна оксидација во споредба со нормалните бази, вметнувањето на база за време на синтезата на ДНК наспроти оксидираната форма на 8-oxoG беше испитувано ин витро.Синтетички шаблон што содржи единечна лезија на 8-oxoG најпрво беше третиран со различни едноелектронски оксиданти или под единечни кислородни услови, а потоа беше подложен на продолжување на прајмерот катализиран од фрагментот Кленов егзо- (Kf exo-), ДНК полимераза алфа на тимусот на теле (пол алфа ) или човечка ДНК полимераза бета (пол бета).Во согласност со претходните извештаи, dAMP и dCMP се вметнуваат селективно наспроти 8-oxoG со сите три ДНК полимерази.Интересно, беше откриено дека оксидацијата на 8-oxoG предизвикува вметнување dAMP и dGMP спроти лезијата со Kf exo- со минлива инхибиција на продолжувањето на прајмерот или појавувањето на местото на модифицираната база.Понатаму, лезијата претставува блок за време на синтезата на ДНК со пол алфа и пол бета.Експериментите со 8-oxoA-модифициран шаблон олигонуклеотид покажуваат дека и 8-oxoA и оксидирана форма на 8-oxoA директно вметнување на dTMP од Kf exo-.Масовната спектрометриска анализа на олигонуклеотидите кои содржат 8-оксоГ пред и по оксидацијата со IrCl62- се конзистентни со оксидацијата на првенствено местото на 8-оксоГ, што резултира со формирање на дел од гуанидинохидантоин како главен производ.Не се добиени докази за формирање на абазични места.Овие резултати покажуваат дека оксидираната форма на 8-oxoG, можеби гванидинохидантоин, може да насочи погрешно читање и погрешно внесување на dNTP за време на синтезата на ДНК.Доколку таков процес се случи in vivo, тоа би претставувало точкаста мутагена лезија што води до G-->T и G-->C трансверзии.Сепак, соодветната оксидирана форма на 8-oxoA првенствено покажува правилно вметнување на T за време на синтезата на ДНК со Kf егзо-.