Производи

Развивме нов систем за испорака на мала интерферентна РНК (siRNA) користејќи троен комплекс со полиетиленимин (PEI) и γ-полиглутаминска киселина (γ-PGA), кои покажаа ефект на замолчување и без цитотоксичност.Бинарните комплекси на siRNA со PEI беа приближно 73-102 nm во големина на честички и 45-52 mV во ζ-потенцијал.Ефектот на замолчување на комплексите siRNA/PEI се зголеми со зголемување на PEI, а комплексите siRNA/PEI со сооднос на полнеж поголем од 16 покажаа значително намалување на луциферазата во клеточната линија на карцином на дебелото црево на глувчето што редовно изразува луцифераза (клетките Colon26/Luc).Сепак, силна цитотоксичност и аглутинација на крвта беа забележани во комплексот siRNA/Lipofectamine и комплексот siRNA/PEI16.Објавено е дека полнењето на катјонските комплекси со анјонско соединение е ветувачки метод за надминување на овие токсичности.Затоа подготвивме тројни комплекси на siRNA со PEI (однос на полнење 16) со додавање на γ-PGA за да се намали цитотоксичноста и да се испорача siRNA.Како што се очекуваше, цитотоксичноста на тројните комплекси се намали со зголемување на содржината на γ-PGA, што го намали ζ-потенцијалот на комплексите.Силен ефект на замолчување споредлив со комплексот siRNA/Lipofectamine беше откриен во тројни комплекси вклучувајќи γ-PGA со анјонски површински полнеж.Високото инкорпорирање на тројни комплекси во клетките Colon26/Luc беше потврдено со флуоресцентна микрокопија.По постигнување на нокдаун на егзогено трансфициран ген, способноста на комплексот да посредува во уривањето на ендогениот ген за одржување на домот, глицералдехид 3-фосфат дехидрогеназа (GAPDH), беше проценета во клетките B16-F10.Троичниот комплекс (комплекс siRNA/PEI16/γ-PGA12) покажа значаен GAPDH нокдаун ефект.Така, развивме корисен систем за испорака на siRNA.