Производи

LecA (PA-IL) е цитотоксичен лектин и адхезин произведен од Pseudomonas aeruginosa кој ги врзува хидрофобните галактозиди со висока специфичност и афинитет.Со користење на lecA-egfp преведувачка фузија и имуноблотска анализа на екстрацелуларната матрица на биофилмот, покажуваме дека lecA се изразува во клетките израснати во биофилм.Во статичните анализи на биофилм и на полистирен и на нерѓосувачки челик, длабочината на биофилмот и површинската покриеност беа намалени со мутација на lecA и подобрена во сојот PAO-P47 кој препродуцира LecA.Покривањето на површината на биофилмот од родителскиот вид, PAO-P47, но не и lecA мутантот на челичните купони, исто така беше инхибирана од растот во присуство или на изопропил-бета-D-тиогалактозид (IPTG) или р-нитрофенил-алфа-D-галактозид ( НПГ).Понатаму, зрелите биофилмови од див тип формирани во отсуство на овие хидрофобни галактозиди може да се дисперзираат со додавање на IPTG.Спротивно на тоа, додавањето на р-нитрофенил-алфа-L-фукоза (NPF) која има висок афинитет за лектините на P. aeruginosa LecB (PA-IIL) немаше ефект врз формирањето или распространувањето на биофилмот.Планктонскиот раст на P. aeruginosa PAO1 не беше засегнат од присуството на IPTG, NPG или NPF, ниту пак сојот можеше да ги користи овие шеќери како извори на јаглерод, што сугерира дека набљудуваните ефекти врз формирањето на биофилмот се должат на конкурентната инхибиција на LecA-лигандот. обврзувачки.Слични резултати беа добиени и за биофилмови одгледувани во услови на динамичен проток на челични купони, што сугерира дека LecA придонесува за архитектурата на биофилмот P. aeruginosa под различни услови на животната средина.

Алфа-L-фукозидаза (EC 3.2.1.51) способна да го ослободи остатокот од т-фукозил од страничниот ланец на ксилоглукан олигосахариди е откриена во лисјата на растенијата Arabidopsis.Покрај тоа, алфа-L-фукозидаза со слична специфичност на супстратот беше прочистена од листовите зелка (Brassica oleracea) за да се добие една лента на SDS-PAGE.Две пептидни секвенци беа добиени од оваа протеинска лента и тие беа искористени за да се идентификува генот Arabidopsis кој кодира за алфа-фукозидаза што предлагаме да се нарече AtFXG1.Дополнително, пронајден е и ген Arabidopsis со хомологија со познати алфа-L-фукозидази, и предложивме да се именува како AtFUC1.И AtFXG1 и ATFUC1 беа хетерологно изразени во клетките на Pichia pastoris и активностите на алфа-L-фукозидаза се лачат во медиумот за култура.Алфа-L-фукозидазата кодирана од AtFXG1 беше активна против олигосахаридите од ксилоглукан XXFG, како и против 2'-фукосил-лактитол, но не и против р-нитрофенил-алфа-L-фукопиранозид.Сепак, хетерологно изразениот AtFUC1 бил активен само против 2'-фукосил-лактитол.Така, првото мора да биде поврзано со метаболизмот на ксилоглукан.