Производи

Диференцијацијата на орбиталните фибробласти во зрели адипоцити и последователната акумулација на масното ткиво е прикажана во прогресијата на Грејвсовата орбитопатија (GO).Автофагијата е вклучена во адипогенезата, но малку е познато за улогата на автофагијата во започнувањето и прогресијата на GO.Целта на оваа студија е да се истражи улогата на автофагијата во патогенезата на GO. Анализирани се експлантите на орбитално масно/сврзно ткиво од пациенти со ГО и од нормални субјекти, како и изолирани орбитални фибробласти.Адипогенезата беше индуцирана со користење на диференцирачки медиум со или без водород пероксид, а автофагијата беше манипулирана со користење на бафиломицин А1 и РНК (shRNA) насочена кон кратка фиба на Atg5.Автофагозомите беа идентификувани со електронска микроскопија.Експресијата на гените поврзани со автофагија и факторите на транскрипција поврзани со адипогенезата беа анализирани со реверзна транскрипција-полимеразна верижна реакција во реално време и/или вестерн блот анализа.Акумулацијата на капките на липидите беше испитана со боење со Oil Red O.Експресијата на гените поврзани со автофагија беше значително повисока во GO ткивата и клетките отколку кај нивните колеги кои не се GO, соодветно.Интерлеукин-1β го зголеми LC3-II, p62 и Atg7 протеинот во GO клетките.Акумулацијата на автофагозомот беше прикажана на 4-тиот ден од адипогенезата и се намали за 10-тиот ден, заедно со формирањето на капки на липидите.Експресијата на протеините LC3 и p62 се зголеми во рок од 48 часа по диференцијацијата и постепено се намали од 4 до 10 ден. Третманот со бафиломицин А1 и падот на Atg5 со shRNA ја инхибираат акумулацијата на капките на липидите и ја потиснуваат експресијата на адипогени маркери. не-GO ткиво и клетки, што сугерира дека автофагијата игра улога во патогенезата на GO.Манипулацијата со автофагија може да биде терапевтска цел за GO.