Производи

Иако етиологијата на дегенерацијата на интервертебралните дискови е слабо разбрана, еден пристап за спречување на овој процес може да биде инхибирање на апоптозата.Во тековната студија, антиапоптотичните ефекти на карбоксиметилираниот хитосан (CMCS) во клетките на јадрото пулпозус (НП) беа испитани со цел да се подобри преживувањето на клетките на дискот.НП клетките на стаорец беа изолирани и култивирани ин витро, а водород пероксид (H2O2) беше искористен за да се изгради моделот на апоптоза на НП-клетката.Одржливоста на клетките беше проценета со анализа на комплет за броење клетки-8.Односот на апоптотичните клетки беше испитан со анализа на двојно боење со анексин V-флуоресцеин изотиоцијанат (FITC) и пропидиум јодид (PI), а морфологијата беше забележана со боење Hoechst 33342.Потенцијалот на митохондријалната мембрана на NP-клетките беше оценет со боење со флуоресценција на родамин 123.Обратна транскрипција (RT) - квантитативна полимеразна верижна реакција (qPCR) беше изведена за да се измерат нивоата на mRNA на индуцирана азотен оксид синтаза (iNOS), каспаза-3, Б-клеточен лимфом (Bcl)-2, колаген тип II и агрекан.Беше направена анализа на Western blot за да се детектираат нивоата на протеини на iNOS и Bcl-2.Резултатите од боењето со анексин V‑FITC/PI и Hoechst 33342 покажаа дека CMCS може да спречи апоптоза на НП клетките на начин зависен од дозата.Боењето со родамин 123 појасни дека CMCS го намалува оштетувањето на потенцијалот на митохондријалната мембрана во NP-клетките третирани со H2O2.Намалена каспаза-3 и зголемена активност на Bcl-2 беа откриени во NP-клетките третирани со CMCS со RT-qPCR и вестерн блот анализа.CMCS, исто така, промовираше пролиферација и секреција на тип II колаген и агрекан во NP клетки третирани со H2O2.Се покажа дека CMCS е ефикасен во спречување на апоптотична клеточна смрт ин витро, покажувајќи ги потенцијалните предности на овој терапевтски пристап во регулирањето на дегенерацијата на дискот.