Производи

X-gal (исто така скратено BCIG за 5-бромо-4-хлоро-3-индолил-β-D-галактопиранозид) е органско соединение кое се состои од галактоза поврзана со супституиран индол.Соединението беше синтетизирано од Џером Хорвиц и соработниците во 1964 година. Формалното хемиско име често се скратува на помалку точни, но исто така и помалку тешки фрази како што е бромохлороиндоксил галактозид.X од индоксил може да биде извор на X во контракцијата на X-gal.X-gal често се користи во молекуларната биологија за тестирање за присуство на ензим, β-галактозидаза, на местото на неговата вообичаена цел, β-галактозид.Исто така се користи за откривање на активноста на овој ензим во хистохемијата и бактериологијата.X-gal е еден од многуте индоксилни гликозиди и естри кои даваат нерастворливи сини соединенија слични на индиго бојата како резултат на ензимски катализирана хидролиза.

X-gal е аналог на лактоза и затоа може да се хидролизира од ензимот β-галактозидаза кој ја раскинува β-гликозидната врска во Д-лактозата.X-gal, кога се расцепува со β-галактозидаза, дава галактоза и 5-бромо-4-хлоро-3-хидроксииндол - 1. -индиго - 2, интензивно син производ кој е нерастворлив.Самиот X-gal е безбоен, па затоа присуството на сино обоен производ може да се користи како тест за присуство на активна β-галактозидаза.Ова исто така овозможува бактериската β-галактозидаза (т.н. lacZ) да се користи како известувач во различни апликации.

Во анализата на два хибриди, β-галактозидазата може да се користи како известувач за да се идентификуваат протеините кои комуницираат едни со други.Во овој метод, библиотеките на геномот може да се проверат за интеракција со протеини користејќи квасец или бактериски систем.Онаму каде што има успешна интеракција помеѓу протеините што се скринираат, тоа ќе резултира со врзување на доменот за активирање со промотер.Ако промоторот е поврзан со генот lacZ, производството на β-галактозидаза, што резултира со формирање на сино-пигментирани колонии во присуство на X-gal, затоа ќе укаже на успешна интеракција помеѓу протеините.Оваа техника може да биде ограничена на скрининг на библиотеки со големина помала од околу 106. Успешното расцепување на X-gal, исто така, создава забележително непријатен мирис поради испарувањето на индолот.

Бидејќи самиот X-gal е безбоен, присуството на сино обоен производ може да се користи како тест за присуство на активна β-галактозидаза.

Оваа лесна идентификација на активен ензим овозможува генот за βгалактозидаза (генот lacZ) да се користи како известувачки ген во различни апликации.