Производи

Бета-D-2'-деокси-2'-флуоро-2'-C-метилцитидин (PSI-6130) е моќен специфичен инхибитор на синтезата на РНК вирусот на хепатитис Ц (HCV) во Huh-7 репликонските клетки.За да се инхибира HCV NS5B RNA полимеразата, PSI-6130 мора да се фосфорилира до 5'-трифосфатна форма.Беа испитани фосфорилацијата на PSI-6130 и инхибицијата на HCV NS5B.Фосфорилацијата на PSI-6130 со рекомбинантна човечка 2'-деоксицитидин киназа (dCK) и уридин-цитидин киназа 1 (UCK-1) беше измерена со користење на поврзана спектрофотометриска реакција.Се покажа дека PSI-6130 е супстрат за прочистен dCK, со Km од 81 microM и kcat од 0,007 s-1, но не бил супстрат за UCK-1.Монофосфатот PSI-6130 (PSI-6130-MP) беше ефикасно фосфорилиран до дифосфатот и последователно до трифосфатот со рекомбинантна човечка UMP-CMP киназа и нуклеозид дифосфат киназа, соодветно.Проучена е инхибицијата на полимеразите од див тип и мутирани (S282T) HCV NS5B RNA.Константата на инхибиција во стабилна состојба (Ki) за PSI-61 30 трифосфат (PSI-6130-TP) со ензимот од див тип беше 4,3 микроМ.Слични резултати се добиени со 2'-C-метиладенозин трифосфат (Ki=1,5 микроМ) и 2'-C-метилцитидин трифосфат (Ki=1,6 микроМ).NS5B со мутацијата S282T, за која е познато дека дава отпор на 2'-C-метиладенозин, беше инхибирана од PSI-6130-TP исто толку ефикасно како дивиот тип.Вградувањето на PSI-6130-MP во РНК катализирана со прочистена NS5B РНК полимераза резултираше со прекин на синџирот.